Protonowa spektroskopia magnetycznego rezonansu jądrowego plazmy od zdrowych osób i pacjentów z rakiem ad

Próbki osocza pobrano od 10 zdrowych kobiet (średni wiek, 46 lat) i 10 kobiet z rakiem (średni wiek, 59 lat), które były reprezentatywne dla pacjentów z różnymi rodzajami i stadiami nowotworów. Próbki pobierano o 9 rano po nocnym poście. Dla każdego osobnika zebrano krew w czterech probówkach i próbki osocza traktowano jak przed analizą NMR: dwie próbki utrzymywano w stanie zamrożonym w 4 ° C i analizowano w temperaturach 21 ° C i 26 ° C. Pozostałe dwie próbki trzymano zamrożone w temperaturze -20 ° C przez dwa tygodnie i analizowano natychmiast po rozmrożeniu w temperaturze obserwacji 21 ° C i 26 ° C. Analiza NMR
Widma protonowego NMR otrzymano za pomocą spektrometru Bruker AM500 Fourier-transform pracującego przy częstotliwości 500,31 MHz w temperaturze 25 do 26 ° C. Blokadę częstotliwościową zapewniono przez dodanie do próbek tlenku deuteru. Piki odniesiono do 3-trimetylosililopropionianu sodu bez korekcji pod kątem wrażliwości. Gdy obecne rezonanse metylu w mleczanie służyły jako drugorzędne odniesienia wewnętrzne. Sygnał z tlenku deuteru został użyty do optymalizacji jednorodności pola magnetycznego, ale precyzyjna regulacja została przeprowadzona przez kontrolę zaniku swobodnej indukcji uzyskanego bez tłumienia wody. Widma były zwykle uzyskiwane przez gromadzenie 32 przebiegów przejściowych (skanów) z szerokością spektralną 5 kHz. Po szóstym drugim impulsie do wstępnego nasycenia wodą obserwowano 90-stopniowy impuls obserwacyjny, a zaniki swobodnej indukcji zbierano z 16 000 punktów danych i transformowano bez rozszerzania linii wykładniczej. Dostępne oprogramowanie komputerowe online zostało użyte do korekcji linii podstawowej do spektralnego regionu będącego przedmiotem zainteresowania. Szerokość linii została zmierzona przez dwóch obserwatorów, a średnia różnica między obserwacjami wyniosła 0,3 Hz. Wielokrotne pomiary różnych porcji pięciu próbek osocza pozwoliły na pomiar szerokości linii odtwarzalny z dokładnością do 0,3 Hz. Pomiar szerokości linii na połowie wysokości pików dla rezonansów metylowych i metylowych dokonano w sposób opisany w innym miejscu 2, a średnią tych szerokości linii określono zgodnie z propozycją Fossel i wsp.1.
Analiza statystyczna
Obliczenia statystyczne przeprowadzono przy użyciu oprogramowania MEDLOG- (c) dla komputerów osobistych kompatybilnych z IBM. Wyniki przedstawiono jako średnie . SD. Test t-Studenta wykorzystano do analizy statystycznych różnic między średnimi grupami, a sparowane t-testy zastosowano do analizy grup w parach. Ponadto wszystkie główne różnice zostały sprawdzone za pomocą nieparametrycznych testów Wilcoxon dla niesparowanych lub sparowanych próbek. Wszystkie podane wartości P są dwustronne.
Wyniki
Obserwacja temperatury i testy przechowywania
Tabela 1. Tabela 1. Wpływ temperatury obserwacji i przechowywania na średnią szerokość linii NMR na 10 zdrowych kobiecych kontroli i 10 kobiet z rakiem. Zgodnie z analizami parowania, nie było istotnej różnicy w odniesieniu do szerokości linii między świeżymi i mrożonymi próbkami osocza od pacjentów z rakiem (P = 0,18 w teście sparowanym w parach) lub kontrolnych (P = 0,5), gdy byli oni zmierzono w 21 ° C (Tabela 1). W 26 ° C nie stwierdzono różnicy w szerokości linii między świeżymi i zamrożonymi próbkami od pacjentów z rakiem (P = 0,4), ale odpowiednia wartość P dla różnicy w zdrowych kontrolach wynosiła 0,04
[więcej w: zaburzenie afektywne dwubiegunowe, witamina c lewoskretna, ospamox cena ]