Nieprawidłowe receptory interleukiny 1 w wydzielającym kortyzę gruczolaku nadnerczy powodującym zespół Cushinga cd

Immunologiczne barwienie próbek gruczolaka nadnerczy i prawidłowego gruczołu nadnerczy. Panel A pokazuje intensywną infiltrację tkanki nowotworowej pacjenta przez leukocyty o czerwonym zabarwieniu immunologicznym przeciwciałami przeciwko CD45 (klon 2B11) (x 200). Przeciwnie, było tylko kilka komórek odpornościowych CD45 + rozproszonych w reprezentatywnej części gruczolaka nadnerczy od innego pacjenta (Panel B, x 400) i w korze zdrowego nadnercza (Panel C, x 400). W panelu D (x 200) gruczolak nadnercza pacjenta wyraża receptory interleukiny typu I (klon C-20) (czerwone zabarwienie). W przeciwieństwie do tego, receptory interleukiny-1 nie są eksprymowane w reprezentatywnej części gruczolaka nadnerczy innego pacjenta (Panel E, x 400) i są eksprymowane tylko w komórkach odpornościowych w korze zdrowego nadnercza (Panel F, x 400) . Reakcję wizualizowano za pomocą 3-amino-etylokarbazolu. Gruczolak pacjenta zawierał wiele komórek, które barwione były przeciwciałami skierowanymi przeciwko specyficznym dla makrofagów antygenom CD45 i CD68, o których wiadomo, że są głównym źródłem interleukiny-1 (Figura 1A). W przeciwieństwie do kilku komórek barwionych tymi przeciwciałami w pozostałych czterech próbkach gruczolaka nadnerczy, trzech próbach raka nadnerczy lub czterech próbkach prawidłowego gruczołu nadnercza (Figura 1B i Figura 1C). Próbki z gruczolaka pacjenta intensywnie zabarwiały się przeciwciałami przeciwko receptorowi I interleukiny (Figura 1D), podczas gdy tkanki z innych gruczolaków i raków nadnerczy oraz normalnej tkanki nadnerczy nie barwiły się tym przeciwciałem (Figura 1E i Figura 1F).
Hybrydyzacja In Situ
Silny sygnał wskazujący na obecność mRNA interleukiny receptora wykryto w gruczolaku kory nadnerczy pacjenta, ale nie w prawidłowej tkance nadnerczy. Przeciwnie, sygnały wskazujące na obecność mRNA receptora II typu II wykryto w regionach okołonaczyniowych wszystkich próbek nadnerczy (dane nie przedstawione).
PCR z odwrotną transkrypcją
Figura 2. Figura 2. Test PCR z odwrotną transkrypcją dla receptorów Interleukiny typu I i typu II (IL-1R) w RNA Messenger z komórek gruczolaka nadnerczy pacjenta. Całkowity RNA został wyizolowany, a cDNA zsyntetyzowano przez odwrotną transkrypcję i zidentyfikowano jako kodowanie dla receptorów interleukiny typu I lub typu II. Wyniki testu potwierdzono przez enzymatyczne trawienie produktów PCR. Ścieżka pokazuje fragment o długości 391 bp, potwierdzony przez trawienie EcoRI (linia 2), aby uzyskać mRNA receptora II typu II. Ścieżka 3 pokazuje standard 100-bp. Ścieżka 5 pokazuje fragment o długości 299 pz potwierdzony przez trawienie za pomocą Mb ol1 (linia 4) za mRNA interleukiny-1 typu I. Ścieżka 6 pokazuje kontrolę ujemną, w której nie stosowano żadnego szablonu. Ścieżka 7 pokazuje genomowy DNA, który zastosowano jako kontrolę ujemną dla receptora interleukiny typu I.
Test odwrotnej transkrypcji-PCR dla mRNA receptora interleukiny-1 w komórkach izolowanych z guza nadnercza pacjenta dawał oczekiwane fragmenty cDNA o 299 parach zasad dla receptorów typu I i 391 bp dla receptorów typu II i enzymatyczne trawienie produktów PCR. potwierdzili wyniki (rysunek 2). Wyniki tego testu były ujemne w komórkach izolowanych z prawidłowych gruczołów nadnerczy i innych gruczolaków nadnerczy
[hasła pokrewne: bifidobacterium, chloramfenikol, ambrisentan ]
[podobne: witamina c lewoskretna, witamina c lewoskrętna w proszku, wkład koronowo korzeniowy ]